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    基因合成技術(shù)酶學(xué)合成及化學(xué)合成法詳解

    更新時(shí)間:2022-04-19      點(diǎn)擊次數:1489
       基因合成是體外合成雙鏈DNA的一種方法,是獲得目標基因的手段之一。人工合成基因出現于20世紀60年代,通過(guò)基因合成可以獲得自然界中不存在的基因。
      基因合成是根據一種蛋白質(zhì)的基因序列,設計合成相互重疊的單鏈寡核苷酸,再通過(guò)PCR方法連接全長(cháng)?;蚝铣刹恍枰0?,是獲取基因的手段之一,通過(guò)提高異源宿主的表達量進(jìn)行全基因合成。目前,該技術(shù)主要應用于基因異源表達,在對基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化后。
     
      基因合成技術(shù)可以分為兩類(lèi):
      1、酶學(xué)合成:以RNA為模板,逆轉錄合成cDNA。這是獲取真核結構基因最主要、常用的方法。由于RNA單一成分難以分離,合成cDNA分子往往混雜,需要基因分離法分離;用這種方法很難得到全長(cháng)互補的DNA分子,所以要進(jìn)一步剪切、拼接。
      2、化學(xué)合成法:化學(xué)法或化學(xué)法與酶學(xué)法相結合合成目的基因。
     
      另外,基因合成技術(shù)還用于合成難以獲取模板的基因和自然界中不存在的新基因等?;蚝铣杉夹g(shù)可以按照人們的意愿設計和靈活合成,正好符合現代生物學(xué)發(fā)展的潮流,將在越來(lái)越多的領(lǐng)域得到應用和發(fā)揮巨大的作用。
     
      基因合成的優(yōu)點(diǎn)
      1、合成周期短,可保證序列100%準確;
      2、基因合成更靈活,可修改基因酶切位點(diǎn)和基因序列,便于下游克隆和實(shí)驗;
      3、研究者按照自己的意愿設計獲得自然界中難以獲得或不存在的基因;
      4、基因合成基因可進(jìn)行密碼子優(yōu)化,使基因在各種生物表達系統中得到良好表達。

    基因合成儀

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